J Clin Invest：揭示USP9X去泛素化ALDH1A3并维系GCSs的间充质特性

外膜母巨噬细胞瘤（GBM）是最类似于和灾难官能的人脑恶官能，其外观上在于广泛的内异质官能。尽管最近在多模式治疗法方面取得了进展，但GBM患者的结果即便如此感沮丧。GBM拥有一个巨噬细胞亚群，被称作GBM干巨噬细胞（GSCs），兼具自我系统设计升级活官能和多向分立体化潜能以及起始潜能。因此，有鉴于探索针对GSC的新治疗法策略。并且，醛脱氢酶（ALDH）真核细胞值得注意19种酶，它们将内源和经年累月醛代谢成可视的羧酸。ALDH1A3是主要的ALDH同工酶，参与人体巨噬细胞的各种生理反应现实生活。越来越多的结论说明了，ALDH1A3在胃癌干巨噬细胞（CSCs）里面观感显现出高活官能，并受到影响这些巨噬细胞质的各种生器物学外观上。在GBM里面，已挖掘显现出ALDH1A3作为维持近充质（MES）GSC的自我系统设计升级和致瘤官能的关键官能底物。然而，MES GSCs里面ALDH1A3失调的组态即便如此是隐秘的。2019年4翌年8日，南京医科大学第一教学医院王慧博制作组等人在The Journal of Clinical Investigation上发表题为“USP9X deubiquitinates ALDH1A3and maintains mesenchymal identity in glioblastoma stem cells”的评论，挖掘显现出USP9X是一种或许的DUB，可适度ALDH1A3多NAD立体化和稳定立体化。并且，USP9X是假设ALDH1A3hi MES GSCs钼的关键官能底物，是MES GSCs自我系统设计升级和致瘤官能所必要的。同时还评估了USP9X抑制对患者可能的MES GSC异形移植模型的潜在治果。为了确定ALDH1A3蛋白究竟被NAD - 酶活官能体系统设计（UPS）转译后依靠，研究成果其他部门首先应用于放线菌酮（CHX）阻断核糖体从头合成并HEK293T巨噬细胞和平常星形外膜巨噬细胞（NHAs）里面的ALDH1A3核糖体技术水平。实际上，ALDH1A3在CHX妥善处理的8小时内逐渐副产物并几乎侦测不到。此外，用酶活官能体抑制剂MG-132妥善处理巨噬细胞导致ALDH1A3蛋白技术水平夙着增加。这些数据库说明了ALDH1A3通过UPS副产物。每一次，研究成果其他部门说服鉴定负责管理ALDH1A3稳定立体化的潜在DUB，并应用于小底物HEK293T巨噬细胞里面的98DUB的siGENOMERTF文库完成RNAi筛选。该研究成果初始筛选鉴定了与ALDH1A3解读相关的4个DUB（USP3，USP9X，USP22和OTUD1）。当这些DUB与HEK293巨噬细胞里面的ALDH1A3共解读时，挖掘显现出只有USP9X能够与介导ALDH1A3直接相互作用，从而暗示USP9X是依靠ALDH1A3稳定官能的夙着候选器物。为了测试这一点，将Flag标记的WT USP9X或催立体化失活的突变体C1566A USP9X（在催立体化亚基的一个关键官能半乳糖里面携带点突变）转染到HEK293T巨噬细胞里面。 WT USP9X而非C1566A突变体的解读以mg依赖官能方式也增加ALDH1A3蛋白技术水平，说明了USP9X以依赖于其DUB活官能的方式也适度ALDH1A3。外膜母巨噬细胞瘤（GBM）干巨噬细胞（GSC）的近充质（MES）亚型代表癌巨噬细胞亚群，其因其总体来袭官能和对常规疗法的抗官能而闻名。最近已提显现出醛脱氢酶1A3（ALDH1A3）作为维持GSC的MES外观上的关键官能决定因素。然而，大力支持异常ALDH1A3解读的组态即便如此难以捉摸。在该研究成果里面，研究成果其他部门挖掘显现出NAD特异官能酶活官能9X（USP9X）是MES GSC里面ALDH1A3的或许去NAD立体化酶。 USP9X与ALDH1A3相互作用，交联并稳定立体化。此外，研究成果结果夙示FACS分选的USP9Xhi巨噬细胞钼兼具高ALDH1A3活官能和有效致瘤潜能的MES GSC。USP9X的消耗夙着降至ALDH1A3，导致MES GSC的自我系统设计升级和致瘤潜能的丧失，这可以通过ALDH1A3的异位解读想得到相当大程度的挽救。此外，研究成果其他部门还证明USP9X抑制剂WP1130诱导ALDH1A3副产物并且在MES GSC衍生的则会异形移植模型里面夙示显现出夙着的治疗法解毒。另外，USP9X与原发官能人GBM探针里面的ALDH1A3解读强烈相关，并且对于兼具MES亚组的患者兼具预后实用价值。总的来说，研究成果结果揭示了USP9X作为ALDH1A3蛋白稳定立体化的关键官能去NAD立体化酶和GSC定向治疗法的潜在靶点。许多现代显现出处：Zhengxin Chen，et al.USP9X deubiquitinates ALDH1A3 and maintains mesenchymal identity in glioblastoma stem cells.J Clin Invest.April 8， 2019